Total RNA extractionCell : extraction (K562)

Total RNA extraction

Cell : extraction (K562)

 

1.     Media (RPMI)+cell을 함께 걷어서 standard for 5min

2.     Centrifuge

3.     Suction

4.     DPBS 1-2ml

5.     Cfg

6.     Suction

7.     Trizol 1ml pipetting (used needle)

8.     200 ul chloroform 넣고 vortexing

9.     RT에서 for 2~3min

10.  4℃ 14000rpm, for 15min

11.  Soup (4ul정도) New e tube에 옮김

12.  Isopropanol (500ul)

13.  RT for 10min

14.  Pellet 남기고 상층액 제거

15.  70% EtOH (-20℃)넣고 1000rpm for 5min

16.  EtOH를 pipet으로 제거 후 pellet을 말림 (for 1hr)

17.  DEPC D.W 넣고 elution (20ul)